人单核细胞白血病细胞THP-1培养指南

XPJ的人单核细胞白血病细胞THP-1是一种来源于人类的白血病细胞系，具有独特的生长特性和应用价值。以下是该细胞的详细培养说明。

一、细胞培养特性

人单核细胞白血病细胞THP-1的形态为圆形，主要以悬浮形式生长。该细胞的冻存条件为无血清冻存液，最佳培养体系为1640培养基，添加10% FBS、0.05 mM β-巯基乙醇和1%双抗。

二、细胞处理与传代

在收货后，首先应将细胞培养至良好状态，再补充完全培养液并封好瓶口，以确保细胞运输过程中的安全。收到细胞后，应使用75%酒精对整个培养瓶进行表面消毒，并在超净台内进行无菌操作。然后，将细胞瓶放入37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态。通过显微镜观察细胞生长情况，并拍摄不同倍数的照片（建议40x, 100x, 200x），前三天的照片为重要的售后依据。

三、细胞传代步骤

细胞传代时，如果汇合度未超过80%，应收集完全培养液并留存5 ml培养基在37℃、5% CO2孵箱中继续培养。一旦细胞密度超过80%，可以进行传代操作，具体步骤如下：

• 悬浮细胞传代：
  1. 方法一：收集细胞，1000 RPM条件下离心8-10分钟，弃上清，加入1-2 ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分装到新皿或新瓶中。
  2. 方法二：可以选择半数换液方案，弃去一半培养基，将剩余的细胞悬起，按1:2到1:3的比例分配至新的培养皿中。
• 细胞冻存：
  1. 当细胞覆盖培养瓶的80%面积时，将悬液收集至离心管，1000 RPM离心5分钟。
  2. 弃去上清，将沉淀细胞与1 ml无血清冻存液混匀，转入冻存管中。
  3. 将冻存管直接置于-80℃冰箱中冷冻，若后续需转入液氮罐，需在-80℃保存超过24小时。
• 细胞复苏：
  1. 从液氮中取出冻存管，迅速置于37℃水浴解冻，直至无结晶后用75%酒精擦拭管外壁。
  2. 将细胞移至含5 ml完全培养基的离心管中，1000 RPM离心5分钟。
  3. 弃去上清，重悬细胞并接种至T25培养瓶，放入37℃、5% CO2培养箱继续培养。
  4. 第二天更换新鲜完全培养基，以保持细胞活性。

四、售后服务政策

针对细胞运输过程中可能出现的问题，我们设定以下重发标准：若在运输途中遇到细胞丢失、瓶身破损、培养液严重泄漏等情况，将予以重发；如遇细胞污染，请您在收到产品48小时内提供真实有效的实验结果。对于细胞活性问题，客户需在7天内提交相关实验结果以便核实。

如有细胞状态不良的情况且未能提供细胞前3天的照片，将不予以重发。详细操作规定和责任划分，将根据具体情况进行协商处理。

如需获得更优质的细胞培养体验，请选择XPJ，我们的细胞产品和服务将助力您的研究工作。