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XPJ人白介素1(IL-1) Elisa试剂盒说明书

来源:盛真林 日期:2025-02-27

XPJ酶联免疫吸附试剂盒(ELISA)专用于科学研究,不可用于医学诊断。本文将介绍该试剂盒的检测原理和样品处理方法。

XPJ人白介素1(IL-1) Elisa试剂盒说明书

检测原理

XPJ试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附测试(ELISA)。首先在预先包被的adropin(AD)抗体微孔中,依次添加待测样本、标准品及HRP标记的检测抗体。在充分温育后,通过严格洗涤去除未结合物。接着,利用底物TMB进行显色反应,TMB在过氧化物酶的催化下由蓝色转变为黄色,最终颜色的深浅与样本中adropin(AD)的浓度呈正相关关系。最后,使用酶标仪在450nm波长下测量样品的吸光度(OD值),进而计算样品的浓度。

样品收集与处理

样品的收集、处理及保存方法如下:

  1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中需避免细胞刺激。收集血液后,将样本以3000转/分钟离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
  2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,离心3000转/分钟30分钟后取上清。
  3. 细胞上清液:离心3000转/分钟10分钟以除去颗粒和聚合物。
  4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,离心3000转/分钟10分钟后取上清。
  5. 保存:如样本未能及时检测,建议按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。解冻时应在室温下进行,确保样品均匀且充分解冻。

操作注意事项

试剂盒组成中提到标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。在试剂准备中,20×洗涤缓冲液需以1:20的比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液添加19份的蒸馏水。

结果判断与标准曲线绘制

绘制标准曲线时,建议在Excel中以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,计算出标准品的线性回归曲线,并依此方程计算各样本的浓度值。

请注意,以上内容仅供科研参考,如需使用XPJ试剂盒进行实验,请严格遵循操作步骤及注意事项。

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