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XPJ支原体巢式PCR试剂盒(2G):快速、高灵敏、低假阳性!

来源:赖君琳 日期:2025-03-15

支原体(Mycoplasma),又称霉形体,是目前已知的最小且结构最简单的无细胞壁原核生物,直径约为0.1~0.3μm,具有高度多变的形态,能够通过滤膜。这些特性使其成为哺乳动物细胞培养中相对常见且难以检测的污染物,支原体因能形成丝状与分枝形状而得名。

XPJ支原体巢式PCR试剂盒(2G):快速、高灵敏、低假阳性!

支原体被归类为细菌中最小的一种微生物,属于柔膜菌门和柔膜菌纲,并下分为不同的目和科。常见的支原体类别包括支原体目和支原体科,主要涵盖支原体属和脲原体属等。支原体的污染对细胞培养造成了多方面的不良影响,已成为该领域中的一个严重问题。据保守估计,在常规的细胞培养中,支原体的污染率为15%到35%,这对实验结果的可信度造成了显著干扰。

在细胞培养中,95%的支原体污染主要源于莱氏无胆甾原体、精氨酸支原体、口腔支原体及其他几个种类的支原体。支原体在培养基中形成的菌落呈现“煎鸡蛋”形状。支原体能够寄生在细胞表面,并能够穿透宿主细胞膜,促进其生长繁殖。

支原体污染的来源主要包括细胞培养液或其成分(如培养基、血清及其他试剂)、实验室操作人员、细胞培养箱、液氮冷藏箱、空气中颗粒和气溶胶,以及抗生素的过度使用、密封不良的细胞培养物和已受污染的细胞等。

支原体的存在对科学研究和实验室的安全性构成多种危害,包括可能导致细胞制品下游纯化过程中因未能有效去除支原体而导致批次报废、污染接触的设备、影响其他正常细胞、损害重要细胞或病毒种种库、迫使实验室停产以进行清除支原体等。这些问题突显了定期进行支原体检测和去除的重要性,以确保细胞培养体系内无支原体,从而保障科学研究的有效进行。

支原体检测方法在生物制药和细胞研究中至关重要,因为支原体污染能够直接影响实验结果和产品质量。目前,常用的支原体检测方法有培养法、PCR(聚合酶链式反应)法、荧光染色法、ELISA(酶联免疫吸附试验)法、qPCR(实时定量PCR)、代谢活性测定等,以下是各方法的优缺点:

  • 培养法:灵敏度高,但需要建立P2实验室,检测周期可达28天,可能存在交叉污染。
  • 指示细胞法:虽灵敏度高且成本低,但同样需要P2实验室且检测周期长达7天。
  • NAT法(核酸扩增技术):灵敏度高,但结果的可靠性高度依赖于样本的质量,可能因交叉污染产生假阳性。
  • ELISA法:实验简单快速,但依赖于抗体,存在一定的局限性。
  • ATP酶法:灵敏度高,操作便捷,但需配合荧光检测仪器。
  • 等温扩增法:灵敏度高,但易受复杂样本基质影响。

在选择合适的支原体检测方法时,需要考虑检测结果的用途、法规要求及方法验证的结果。如果检测涉及产品放行,需采用药典方法如培养法或指示细胞法;而针对日常检测或研发中的快速检测,则推荐使用如巢式PCR法、LAMP等温扩增法、qPCR法、 ATP酶法和ELISA法等快速方法。

此外,XPJ品牌推出了一系列支原体快速检测试剂盒,包括荧光探针qPCR法、一步恒温显色法和巢式PCR法等。这些试剂盒起到了在各种生物样品(如细胞培养、实验动物分泌物和动物血清等)中快速检测支原体感染的作用,灵敏度可达25copies/μL,设计合理且操作简便,适合日常检测使用。

总之,支原体检测是确保细胞培养和生物制品安全及可靠的重要步骤,而XPJ的高效检测产品将为更加严谨的实验和研究提供可靠的保障。

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